高效液相色譜儀的使用和維護保養

高效液相色譜儀的使用和維護保養

高效液相色譜儀也叫高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜等，它是在經典液相色譜法的基礎上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發展起來的。它與經典液相色譜法的區別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相，故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。由于液相色譜分析技術涉及的樣品種類繁多、樣品組成及其濃度復雜，樣品物理形態多變，對液相色譜儀的正常分析測定造成一些干擾因素，如果不注意儀器的維護和保養，會對日常的分析測定帶采不便，所以需要對儀器的使用以及維護要做一些了解才能熟練掌握這種分析技術。高效液相色譜儀的操作過程：1.翻開HPLC工作站（包含計算機軟件和色譜儀），銜接好活動相管道，銜接檢測體系。2.對抽濾后的活動相進行超聲脫氣10-20分鐘。3.過濾活動相，根據需求挑選不一樣的濾膜。4進入HPLC操控界面主菜單，點擊manual，進入手動菜單。5.有一段時刻沒用，或許換了新的活動相，需求先沖刷泵和進樣閥。沖刷泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖刷進樣閥，需求在manual菜單下，先點擊purge，再點擊start，沖刷時速度不要超越10ml/min。6.調理流量，初度運用新的活動相，能夠先試一下壓力，流速越大，壓力越大，通常不要超越2000。點擊injure，選用適宜的流速，點擊on，走基線，調查基線的狀況。7.規劃走樣辦法。點擊file，選擇select?users?and?methods，能夠選擇現有的各種走樣辦法。若需樹立一個新的辦法，點擊new?method。選擇需求的配件，包含進樣閥，泵，檢測器等，根據需求而不一樣。選完后，點擊protocol。一個完整的走樣辦法需求包含：a.進樣前的穩流，通常2-5分鐘；b.基線歸零；c.進樣閥的loading-inject變換；d.走樣時刻，隨不一樣的樣品而不一樣。8.進樣和進樣后操作。選定走樣辦法，點擊start。進樣，一切的樣品均需過濾。辦法走完后，點擊postrun，可記載數據和做符號等。悉數樣品走完后，再用上面的辦法走一段基線，洗掉剩余物。9.關機時，先關計算機，再關液相色譜儀。高效液相色譜儀操作注意事項：1、液相色譜儀的流動相應采用色譜純溶劑，以滿足要求、避免損壞色譜柱2、待分析的樣品必須徹底溶解澄清、過濾，以避免堵塞、損壞色譜柱;3、液相色譜儀流動相需經過濾、除氣后方可使用;4、嚴禁使用有污染的水等沖洗色譜柱，避免將互不相溶的溶劑一同進入泵內;5、液相色譜儀分析完成后，須注意及時清洗色譜柱和檢測器的比色池。