威正翔禹生物科普關(guān)于胎牛血清知識(shí)問(wèn)答三

威正翔禹生物科普：關(guān)于胎牛血清知識(shí)問(wèn)答（三）

胎牛血清是指懷孕5-8個(gè)月的母牛被屠宰后，發(fā)育未完全的胎牛心臟穿刺采血后，通過(guò)一系列工藝處理最終獲得。此時(shí)胎牛血中含有特殊的生長(zhǎng)發(fā)育因子，一旦胚胎發(fā)育完全這些因子自動(dòng)消失。那么，面對(duì)如此珍貴的胎牛血清，實(shí)驗(yàn)人該如何防治黑點(diǎn)生成、如何儲(chǔ)存使用血清呢？

1、細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成？

答：（1）盡可能地減少血清凍融次數(shù)。

（2）培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴。

（3）培養(yǎng)基保持最佳PH值7.0-7.2。

（4）嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗。

（5）掌握細(xì)胞傳代的最佳時(shí)機(jī)，細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過(guò)老。

2、如何儲(chǔ)存使用血清？

答：儲(chǔ)存條件：血清一般儲(chǔ)存于－20℃，同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。購(gòu)買大包裝的血清后，需要分裝成小包裝，儲(chǔ)存于－20℃，使用前融化。關(guān)于血清融化，我們推薦以三步來(lái)進(jìn)行（詳細(xì)可參閱《關(guān)于胎牛血清知識(shí)問(wèn)答（一）》）。例如，500ml的胎牛血清，首先在室溫條件下放置90min，然后再20℃水浴放置25min，最后在37℃水浴放置35分鐘即可。

使用濃度：自從有了合成培養(yǎng)基，血清就是作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用，使用濃度一般為5－20％，最常用是10％。過(guò)多血清容易使培養(yǎng)中的細(xì)胞發(fā)生變化，特別是一些二倍體的無(wú)限細(xì)胞系，迅速生長(zhǎng)之后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。

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